実験医学別冊　タンパク質実験ハンドブック

出版社： 羊土社
著者：
発行日： 2003-08-15
分野： 基礎・関連科学  >  基礎医学関連科学一般
ISBN： 4897063698
書籍・雑誌
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商品紹介

第３版発行後新たに開発された技術を取り入れ，時代の進歩に対応したタンパク質実験書の決定版！タンパク質精製法や抗体作製から，SDS電気泳動，質量分析，プロテインチップなどのプロテオーム解析に必要な手法まで，タンパク質を扱うすべての実験法を網羅．具体的な実験のコツや注意点が豊富で，初心者にもわかりやすい！

目次

  • 実験医学別冊　タンパク質実験ハンドブック

    ―目次―

    第１章　タンパク質研究ストラテジー

    第２章　タンパク質精製法
    1．タンパク質精製を始める前に
    2．精製の進め方
    3．タンパク質の抽出と分画
    4．カラムクロマトグラフィーによる精製
    　　　1）イオン交換クロマトグラフィー
    　　　2）ゲル濾過クロマトグラフィー
    　　　3）疎水性クロマトグラフィー
    　　　4）アフィニティークロマトグラフィー

    第３章　タンパク質の分離と同定
    1．はじめに
    2．SDS電気泳動法（SDS-PAGE）によるﾀﾝﾊﾟｸ質の分離
    3．目的ﾀﾝﾊﾟｸ質のｹﾞﾙ内ﾌﾟﾛﾃｱｰｾﾞ消化と生成ﾍﾟﾌﾟﾁﾄﾞの回収
    4．MALDI-TOF MSによるペプチド質量の測定および
    　　 データベース検索による目的タンパク質の同定
    5．LC-MS/MSによるペプチド質量の測定および
    　　 データベース検索による目的タンパク質の同定

    第４章　抗体作製と精製
    1．免疫動物の選択と免疫
    2．ポリクローナル抗体の作製
    3．モノクローナル抗体の作製
    4．ﾌｧｰｼﾞﾃﾞｨｽﾌﾟﾚｲを用いたﾉﾓｸﾛｰﾅﾙ抗体の作製
    5．ペプチド抗体の作製と応用
    6．抗体の精製

    第５章　リン酸化部位の同定と利用
    1．リン酸化アミノ酸分析
    2．リン酸化部位の同定
    3．リン酸化ペプチド抗体の作製と応用
    4．抗リン酸化ﾁﾛｼﾝ・ｾﾘﾝ・ｽﾚｵﾆﾝ抗体を用いた
    　　 イムノブロッティング
    5．リン酸化部位変異体（mimic）の導入と応用

    第６章　発現タンパク質の作製と利用
    1．大腸菌によるタンパク質の発現と精製
    2．バキュロウイルスによるタンパク質の発現と精製
    3．融合タンパク質の発現と精製（FLAG-tag myc-tag）
    4．ﾗﾑﾀﾞﾑinsertion/deletion変異法を用いた変異ﾀﾝﾊﾟｸ質の作製

    第７章　タンパク質の検出
    1．ウエスタンブロット法
    2．抗体による免疫染色
    3．in situ hybridization法
    4．ノーザンブロット法
    5．内在性タンパク質の細胞内局在の観察（蛍光抗体染色）

    第８章　動物細胞でのタンパク質の発現と応用
    1．プラスミドを用いた一過的な発現
    2．安定形質発現株の作製法
    3．レトロウイルスベクターを用いた発現
    4．アデノウイルスベクターを用いた発現
    5．マイクロインジェクション
    6．タンパク質の導入（protein transfection）
    7．蛍光タンパク質の構築，発現と生細胞での解析
    8．GFP-PLCδ1-PH，GFP-Akt-PHによるｲﾉｼﾄｰﾙﾘﾝ脂質の局在観察
    9．直接標識したタンパク質の導入と観察
    10．FRET
    11．BRET
    12．FACSを用いた発現細胞のsorting
    13．siRNA導入による遺伝子発現阻害

    第９章　タンパク質間相互作用分析とタンパク質性質の解析
    1．免疫沈降法
    2．融合タンパク質を用いた結合タンパク質の探索
    3．酵母two-hybrid法
    4．酵母three-hybrid法
    5．in vivoタンパク質間相互作用検出法
    6．プロテインマイクロアレイ解析
    7．BIACOREによるタンパク質相互作用の解析
    8．タンパク質とlipidとの相互作用解析
    9．タンパク質と核酸の相互作用
    10．アクティビティーゲル法

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