RNA-Seq実験ハンドブック

出版社: 羊土社
著者:
発行日: 2016-04-10
分野: 基礎医学  >  基礎医学一般
ISBN: 9784758101943
書籍・雑誌
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商品紹介

次世代シークエンサーの最注目手法に特化し,研究の戦略,プロトコール,落とし穴を解説した待望の実験書が登場!発現量はもちろん,翻訳解析など発展的手法,各分野の応用例まで,広く深く紹介します.

目次

  • RNA-Seq実験ハンドブック

    ―目次―

    概論:RNA-Seqとは何か? 何ができるのか?

    第1章 RNA-Seqの基本
        試料調製と発現解析の標準的なプロトコール.
     1. Total RNAの抽出 
     2. RNAとライブラリーの定量とクオリティコントロール 
     3. Stranded mRNA-Seq 
     4. RNA-Seqデータのマッピング 遺伝子発現解析を例に 
     5. miRNAを標的としたRNA-Seq RNA免疫沈降法を中心に 
     6. 細胞画分からのRNA-Seq 目的に応じたRNAを解析するために
     7. 組織サンプルの固定とRNA抽出 
     8. ヒト血液検体のトランスクリプトーム解析
       ゲノムコホートにおける前処理・輸送・抽出を例に
     9. 微量サンプルからのRNA-Seq
     10. RNA-Seq用途別シークエンサーの選び方

    第2章 発展的手法
        発現解析以外の発展的手法およびシングルセル解析.
     1. CAGE法を用いた転写制御領域の解析 
     2. 転写開始点データベースDBTSSによる転写制御解析 
     3. RNA-SeqによるA-to-I RNA編集の検出 
     4. 【3'-seqによる選択的ポリアデニル化の網羅的な解析 
     5. リボソームプロファイリングによる細胞内翻訳反応評価 
     6. RNAの合成・分解を定量するシークエンス技術 
     7. BRIC-Seqによる網羅的なRNA分解速度測定法 
     8. CLIP法とその改良法によるタンパク質結合RNAの高解像度解析
     9. シングルセル(1):機器・方法編
       C1以外で世界的に開発されている機器・方法について
     10. シングルセル(2):試薬・キット編
       改変型SMART-Seq2プロトコールを交えて
     11. シングルセル(3):C1システムのプロトコールと実施例
     12. 超並列レポーターアッセイによる転写制御解析

    第3章 応用例
     1. 細菌叢研究におけるRNA-Seq
       メタトランスクリプトームによる菌種・機能の解析
     2. 免疫研究におけるRNA-Seq システム免疫学へのアプローチ
     3. がん研究におけるRNA-Seq
       がんのシステム異常を情報学的に俯瞰する
     4. 神経研究におけるRNA-Seq
       シングルセルRNA-Seqによる新たな細胞種の発見を例
     5. 遺伝性疾患研究におけるRNA-Seq
       先天異常症候群における遺伝子発現異常を例に
     6. 感染症研究におけるRNA-Seq
       マラリアの宿主?病原体相互作用を例に

    第4章 新技術
     1. 多様なトランスクリプトーム解析技術
     2. PacBio1分子実時間シーケンシング
       ゲノム,トランスクリプトーム,エピゲノム解析への応用
     3. ナノポアシークエンサーMinION 超小型装置によるRNA解析

    第5章 インフォマティクスとデータベース
     1. マイクロRNA研究を加速するデータベース
     2. RNA2次構造とRNA間相互作用の予測
     3. ヒトのオミクス情報を扱うデータベース
       トランスクリプトームデータベースGTExと
       東北メディカル・メガバンク事業を例に
     4. FANTOM/ENCODEに関するデータベース・ウェブツール
       大規模プロジェクトのデータを利用する

    Column
     1. RNA-SeqのためのR教育の現状と課題
     2. 頭の痛いノンコーディングRNA
     3. RNA-Seqはこうして誕生したーそしてデータ再利用へ
     4. NGSデータ解析者の苦悩とその解決策

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